蛋白組學(xué)的思路——之前時公司做的,已經(jīng)分析過了,我只是嘗試自己做一下。
1、得到蛋白原始數(shù)據(jù),raw
2、搜庫,用各種軟件,自己體會的時MaxQuant,但是還沒這個水平,最終放棄。參考http://m.itdecent.cn/p/1bcd7dcd99f0,但是該沒那么簡單,公司用的軟件時Proteome Discoverer,收費(fèi),數(shù)據(jù)庫用的Uniport的。
3、得到匹配數(shù)據(jù),然后不同組比較,得到fold-change(變異系數(shù)),這個就是log2(B/A)就是B相對于a的變異系數(shù),這次試驗(yàn)取的是大于1.2或者小于0.83(0.83就是1.2的倒數(shù))的蛋白,這就是差異蛋白了,實(shí)際上所選擇的就是小于-0.27的為表達(dá)下降,大于0.27的就是表達(dá)上升,變異系數(shù)一般也可以選擇1.5與0.6或者2與0.5,根據(jù)差異蛋白多少決定,200-500個蛋白比較合適。
4、GO富集分析與KEGG富集分析
具體的GO分析參考GO富集分析(轉(zhuǎn)載)
[基因組學(xué)]使用biomaRt做水稻ID轉(zhuǎn)換及相關(guān)信息的填充
富集分析其實(shí)就是將差異蛋白進(jìn)行注釋,然后看差異蛋白在GO數(shù)據(jù)庫與KEGG通路的不同Term下的多少與分布情況,然后繪制散點(diǎn)圖熱圖柱狀圖。(定義不準(zhǔn)確,還要多學(xué)習(xí))
KEGG參考這里https://zhuanlan.zhihu.com/p/107225881?utm_source=cn.wiz.note
還有一些沒弄明白的,比如火山圖聚類分析熱圖等。