1、藥品質(zhì)量標準分析方法驗證的目的
證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求 。在建立 藥品 質(zhì) 量 標 準 時，分析方法需經(jīng)驗 證 ；在 藥 品 生 產(chǎn) 工 藝 變 更 、制 劑 的 組 分 變 更、原分析方法進 行 修 訂 時 ，則 質(zhì) 量 標 準 分 析方法也需進行驗證。方法驗證理 由、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標準起草說明或修訂說 明 中 。生物制品質(zhì)量控制中采用的方法包括理化分析方法和 生 物 學 測 定 方 法 ，其中理化分析方法的驗證原則與化學藥品 基 本 相 同 ，所以可參 照本 指 導 原 則 進 行 ，但在進行具體驗證 時 還 需 要 結(jié)合 生 物 制 品 的 特 點考 慮；相對于理化分析方法而 言 ，生 物 學 測 定 方 法存在更多的影響因素，因此本指導原則不涉及生 物 學 測 定 方 法 驗 證 的 內(nèi)容 。
2、驗證的分析項目
鑒 別 試 驗 、限量或定量檢查、原料藥 或 制 劑 中有效成分含量 測 定 ，以及制劑中其他成分( 如防腐劑 等 ，中藥中其他殘留物、添加劑等) 的測定。藥品溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量等的測定方法也應(yīng)進行必要驗證。
3、驗證指標 ?
準 確 度 、精 密 度 （包 括 重 復 性 、中間精密度 和 重 現(xiàn) 性 ）、專 屬 性 、檢 測 限 、定 量 限 、線 性 、范圍和耐用 性 。
在 分 析 方 法 驗 證 中 ，須采用標準物質(zhì)進 行試驗。 由于分 析 方 法 具 有 各 自 的 特 點 ，并隨 分 析 對象 而變 化 ，因此需要視 具 體 方 法擬 訂驗 證 的 指 標 。表 1 中列出的分析項目和相應(yīng)的驗 證 指 標 可 供 參考 。
3.1準確度
系指采用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近 的 程 度 ，一 般 用回收率（％ ) 表 示 。準確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定。
3.1.1化學藥含量測定方法的準確度
原料藥采用對照品進行測 定，或用本法所得結(jié)果與已知準確度的另一個方法測定的結(jié)果進行比較。制劑可在處方量空 白 輔 料 中 ，加入已知量被測物對照品進行測定。如不能得到制劑輔料的全部組分，可向待測制劑中加入已知量的被測物對 照品進行測定，或用所建立方法的測定結(jié)果與已知準確度的另一種方法測定結(jié)果進行比較。準 確 度 也 可 由 所 測 定 的 精 密 度 、線 性 和 專 屬 性 推 算出來。
對照品（Reference Standard）：
指國家藥品標準中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等的標準物質(zhì)。
一級標準品： 官方標準品或者ATS通過質(zhì)量守恒法標定含量的標準品；
二級標準品(工作對照品)： 采用外標法標定含量的標準品（一級標準品作為對照） 。
含量（Assay）：包括絕對含量和相對含量。
絕對含量： 特定物質(zhì)中所包含某種物質(zhì)的量，指絕對百分含量， %。
相對含量： 某物質(zhì)相對其標示量的含量， %?
標示量（Labeled amount）：指該劑型單位劑量的制劑中規(guī)定的主藥含量 。
3.1.2?化學藥雜質(zhì)定量測定的準確度
可向原料藥或制劑處方量空白輔料中加入已知量雜質(zhì)進行 測 定 。如 不能 得到 雜質(zhì)或降解產(chǎn)物對照品，可用所建立方法測定的結(jié)果與另一成熟的方法 進行比較 ，如藥典標準方法或經(jīng)過驗證的方法 。在不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的校正因子或不能測得對主成分的相對校正因子的情況下，可用不加校正因子的主成分自身對照法計算雜質(zhì)含量。應(yīng)明確表明單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當于主成分的重量比（％) 或面 積 比 （％ )。
回收率 ％= (C- A ) /B X 100%
式 中 A 為供 試 品 所 含被 測 成分 量 ；B 為 加 入 對 照 品 量 ；C 為 實 測 值?
3.1.3?校正因子的準確度
對色 譜 方 法 而 言，
①絕 對 （或 定 量 ）校正因子：是指單位面積的色譜峰代表的待測物質(zhì)的量。
②相對校正因子：待測定物質(zhì)與所選定的參照物質(zhì)的絕對校正因子之比，即為相對校正因 子。相對校正因子 計算法常應(yīng)用于化學藥有關(guān)物質(zhì)的測定、中藥材及其復方制劑中多指標成分的測定。校正因 子 的 表示 方法 很多，本指導原則中的校正因子是指氣相色譜法和髙效液相色譜法中的相對重量校正因子。
相 對 校 正 因 子 可 采 用 替 代 物 （對 照 品 ）和 被 替 代 物 （待測物) 標 準 曲 線 斜 率 比 值 進 行 比 較 獲 得 ；采用 紫 外 吸 收 檢 測 器時 ，可將替代物（對照 品 ）和 被替代物（待 測物）在規(guī)定波長和溶劑條件下的吸收系數(shù)比值進行比較，計 算 獲 得。
①響應(yīng)因子（Response factor）： 指單位濃度的響應(yīng)，HPLC中指峰面積和濃度的比值。Response factor=Response（in response units）/concentrate（in mg/ml）。
②相對響應(yīng)因子（Relative response factor）： 是指有關(guān)物質(zhì)相對主成分的響應(yīng)因子。
Relative response factor =Response factor of individual related?substance/Response factor of ?drug?substance。
③相對校正因子（Relative correction factor）： 相對響應(yīng)因子的倒數(shù) 。
3.1.4 . 數(shù)據(jù)要求
①在 規(guī) 定 范 圍 內(nèi) ，取 同 一 濃 度 （相 當 于 100%濃 度 水 平 ）的供試品，用 至 少 測 定 6 份 樣 品 的 結(jié) 果進 行 評 價 。
②或 設(shè) 計 3 種不同濃度，每 種 濃 度 分 別 制 備 3 份供 試 品 溶 液 進 行 測 定 ，用9 份樣品的測定結(jié)果進行評價。
對 于 化 學 藥 ，一般中間濃度加入量與所 取供試 品中 待測定 成分量 之比控制在1 : 1 左 右，建 議 高 、中 、低濃度對照品加入量與所取供試品中待測定成分 量 之 比 控 制 在 1.2 : 1、1 : 1、0.8 ：1 左 右 ，應(yīng)報告已知加入 量 的 回收 率 （％ )，或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其相 對 標 準 偏差 或置 信區(qū) 間（置 信 度 一 般 為 9 5 % )?
?對 于 中 藥 ，一般中間濃度加人量與所取供試品中待測定成分量之比控制在 1 : 1左 右 ，建 議 高 、中 、低濃度對照品加人量與所取供試品 中 待 測 定 成 分 量 之 比 控 制 在 1 .5 ：1、1 : 1 、0.5 ： 1 左 右 ，應(yīng) 報 告 供 試 品 取 樣 量 、供 試 品 中 含 有 量 、對 照 品 加 入 量 、測定 結(jié) 果和 回收 率 （％) 計 算 值 ，以及回收率（％ )的相對標準偏差 （RSD% )或 置 信 K 間 。
③對 于 校 正 因 子 ，應(yīng) 報 告 測 定 方 法 、測 定 結(jié) 果 和 RSD% 。
樣 品 中 待 測 定 成 分 含 量 和 回 收 率 限 度關(guān) 系 可 參 考 表 2。在 基 質(zhì) 復 雜 、組 分 含 量 低 于 0.01% 及多成分 等 分 析 中 ，回收率 限度 可適 當放 寬。
3.2精密度
精 密 度 ：系 指 在 規(guī) 定 的 條 件 下 ，同 一份 均勻供試 品，經(jīng)多次取 樣 測 定 所 得 結(jié) 果 之 間 的 接 近 程 度 。精 密 度 一 般 用 偏 差 、標準 偏 差 或 相 對 標 準 偏 差 表 示 。
準確度（Accuracy）： 表示分析結(jié)果與真實值接近的程度。測量值與真實值越接近，就越準確。
精密度（Precision）： 在規(guī)定的測試條件下，用同一均勻供試品，經(jīng)多次取樣，測量的各實驗指之間相互接近的程度。各測量值間越接近， 精密度就越高，越精密；
不確定度（uncertainty）： 與精密度向?qū)?yīng)，精密度越高，不確定度就越小。
偏差（deviation ）： 在日常應(yīng)用過程中，由于真值不可獲得，此時用多次測量，來獲得相對真值，即為均值，作為真值。 di = xi - X 。X是平均值。
相對偏差（RD， relative deviation） ：平均偏差占平均值的百分比 。
絕對偏差=單次測定值－平均值?
平均偏差=各絕對偏差絕對值的平均值 ?
標準偏差（Standard Deviation ）：是一種量度數(shù)據(jù)分布的分散程度之標準，用以衡量數(shù)據(jù)值偏離算術(shù)平均值的程度。 使用標準偏差突出了較大偏差的存在對測量結(jié)果的影響，主要考察測量的精密度 。標準偏差越小，這些值偏離平均值就越少。主要考察測量的精密度。
相對標準偏差(Relative standard deviation ，也叫變異系數(shù)，coefficient of variation,cv)：實際工作中也是主要用來表示分析結(jié)果的精密度
在 相 同 條 件 下 ，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度 稱 為 重 復 性 ；
在 同 一 個 實 驗 室 ，不同時間由不同分析人員用不 同設(shè) 備測 定 結(jié) 果 之 間 的 精 密 度 ，稱 為 中 間 精 密 度 ；
在不同 實 驗 室 由 不 同 分 析 人 員 測 定 結(jié) 果 之 間 的 精 密 度 ，稱為重現(xiàn) 性 。含 量 測 定 和 雜質(zhì) 的 定 量 測 定應(yīng) 考察 方 法 的精 密度 。
3.3專 屬 性?
系 指 在 其 他成 分( 如 雜 質(zhì) 、降 解 產(chǎn) 物 、輔 料 等 ）存
在 下 ，采 用 的 分 析 方 法 能 正 確 測 定 被 測 物 的 能 力 。鑒別反
應(yīng) 、雜 質(zhì) 檢 查 和 含 量 測 定 方 法 ，均 應(yīng)考 察 其 專 屬 性 。如方法
專 屬 性 不 強 ，應(yīng) 采 用 多 種 不同 原理 的 方 法予 以 補 充
