熒光PCR

1. 分裝病毒

保存于進(jìn)口EP管,300u 一個(gè)
封裝前充分震蕩保存液

2. 機(jī)提核酸

  • 準(zhǔn)備深96孔板、試劑盒、樣品300u、陽(yáng)性對(duì)照(fluA、fluB)
  • 96孔板中加入:
    第一列:裂解液300u、PK10u、AC4u、磁珠10u、樣本(最后加)
    第二列:Wash Buffer Ⅰ 500u (用前混勻)
    第三列:Wash Buffer Ⅱ 500u
    第四列:Wash Buffer Ⅲ 550u
    第五列:空
    第六列:Elution B 30u
  • 最后先加樣品,后加陽(yáng)性對(duì)照;移液槍吹吸混勻。
  • 充分反應(yīng)10分鐘后,上機(jī)器

3. 準(zhǔn)備體系:25u

要分別準(zhǔn)備fluA和fluB的體系

  • T: 5u
  • 5×buffer : 稀釋至1×,也就是 5u
  • dNTP:1u
  • 引物 F: 0.2u;R:0.2u
  • probe:0.2u (現(xiàn)配現(xiàn)用,母液1:10稀釋)
  • E :1u
  • 水:剩余的:12.4u

4. 上機(jī)

  • 將提取出的核酸與此前配好的體系分裝入八連管中
  • 注意:不要有氣泡
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