激光共聚焦簡明教程：
- 按照操作規(guī)范，依次開啟PC Microscope(顯微鏡) 、Scanner Power ( 掃描電源) 、Laser Power( 激光電源) 以及Laser Emission( 激光開關(guān)) 。
- 啟動(dòng)LAS X 軟件
- 在Configuration里面打開實(shí)驗(yàn)所需的激光；
- 根據(jù)不同的染色，選擇SEQ序列掃描，并添加不同的通道；例如用了DAPI、FAM、cy3標(biāo)記的脂肪體樣本。因?yàn)椴煌玖蠈?yīng)的激發(fā)和吸收波長不同，而檢測器上面設(shè)置波段的滑塊是固定在檢測器上的，所以必須注意的一點(diǎn)就是，按照波長順序進(jìn)行不同檢測器上面的設(shè)置。
DAPI的最大激發(fā)波長為340nm，最大發(fā)射波長為488nm；
FAM （羧基熒光素）激發(fā)波長 492 nm，發(fā)射波長 518nm；
cy3的最大激發(fā)波長為512nm，最大發(fā)射波長為570nm。
根據(jù)上面波段特性，我們設(shè)置了SEQ1設(shè)置為DAPI，SEQ2設(shè)置為FAM，SEQ3設(shè)置為cy3，
圖片.png
在不同 SEQ序列上進(jìn)行詳細(xì)的參數(shù)設(shè)置，包括開啟激光，波段滑塊設(shè)置，Gain值等等，這是進(jìn)行圖像呈現(xiàn)的關(guān)鍵之關(guān)鍵。
由于HyD檢測器較昂貴，一般PMT即可滿足大部分實(shí)驗(yàn)需求，所以平臺(tái)規(guī)定操作HyD需聯(lián)系平臺(tái)，所以切忌不要開啟hyD檢測器.
