石蠟切片小技巧

在臨床病理及臨床科研制片中，制備出合格優(yōu)良的優(yōu)質(zhì)組織切片，是保障后續(xù)染色的先決條件，一張平整無刀痕的制片，往往受到材料本身、固定、氣候、脫水、刀片、玻片等不同客觀因素的影響，今天我們來給大家交流下我們制片的小技巧。

常規(guī)病理技術(shù)染色流程

脫水：按一定的切面要求對組織進(jìn)行取材，固定充分，組織脫水透明完全，脫水的組織不易太厚，一般厚度在3mm左右，脫水程序可設(shè)置多個，大組織和小組織分開脫水，脂肪組織最好單獨(dú)脫水。

加濕：南方和北方氣候差異大，如空氣比較干燥，切片機(jī)旁邊可放置一臺加濕器，增加空氣中的濕度，放置切片蠟帶靜電，切片自然打卷。

刀片平整鋒利：切片前蠟塊預(yù)冷，選擇質(zhì)量比較好的刀片，道口韌性強(qiáng)刀口鋒利，如蠟帶上有刀痕，移動道口再嘗試，觀察還是因組織內(nèi)有異物切片不完整；切片時(shí)注意組織層次、紋理、纖維、肌肉等方向與切片刀平行。避免用力過重或過輕，影響切片質(zhì)量。

展片：保持水面清潔，展片溫度要合適，一般40-42℃，對于展片困難的組織，可先在冷水中展片，再轉(zhuǎn)移到溫水中充分展開。

玻片的選擇:對于不同的實(shí)驗(yàn)類型可選擇不同黏附程度的玻片，如免疫組化實(shí)驗(yàn)或多色免疫熒光實(shí)驗(yàn)，盡量選擇粘附性更好的玻片，骨及皮膚樣本特殊，在某些實(shí)驗(yàn)中也容易脫片，可測試用不同類型的玻片，提高防脫效率。

撈片：玻片傾斜，從組織一端黏附到玻片快速拷起，如有褶皺可退到水槽，從新?lián)破?。組織盡量撈片方正靠近玻片中央位置，以便后續(xù)滴染實(shí)驗(yàn)操作和組織全景成像。

存放：晾干后裝盒備用，如短時(shí)間不使用后續(xù)有組化方面需求，玻片及蠟塊封蠟低溫保存。

其他：對于特殊的樣本如骨組織，如脫水不完全，骨松質(zhì)的位置后續(xù)染色容易脫片，調(diào)整拷片時(shí)間和溫度，具體看實(shí)驗(yàn)需要觀察的部位是否可以勉強(qiáng)使用；對于定位切片的樣本，每切一次都需要修整蠟塊，切面會發(fā)生變化，盡量一次性多切幾張玻片備用。

劣質(zhì)切片展示

優(yōu)質(zhì)切片